小麦7OE亚基引入及揉捏特性的研究

编辑:宣统部 2019-03-11 09:24

利用195矮小麦和金强5号杂交获得的高代菌株,研究了7oe亚基的分布,探讨了7oe亚基材料与捏合性能的关系。结果表明,195种材料中有6种扩增出447bp片段,占测试品系的3.07%。 7oe亚基对小麦揉捏特性的某些指标具有显着的积极作用。在存在或不存在7oe基因间系数的情况下,峰高和8分钟带宽差别很大,包括7e亚基材料和8e分钟带内的非7oe亚基材料。该指标达到了非常显着的差异。 7oe亚基对改良小麦的品质有很大影响。 8分钟的带宽可以作为质量分析的重要指标之一。该标记具有良好的特异性,可用于中国小麦的品质改良。

关键词矮小麦; bx7oe;揉混合特性;分子标记

小麦贮藏蛋白决定了小麦的品质特性,决定了面团的弹性和伸长性。高分子量麦谷蛋白亚基(hmw-gs)仅占小麦贮藏蛋白的10%,但在加工品质中起着决定性作用。 Hmw-gs由染色体1a,1b和1d的长臂上的位点控制,它们统称为glu-1位点。不同的hmw-gs亚基对面团特性和烘焙品质有不同的影响。 Glu-a1编码1和2 *亚基,glu-b1编码7 + 8,17 + 18,13 + 16和14 + 15亚基和glu-d1编码5 + 10亚基都有助于面包加工质量有积极作用[1-2]。最近的研究发现,1bx基因的复制导致7亚基的过表达,这可以显着增加面团的强度[6-7]。在中国也对7oe亚基进行了初步研究。张平平[4]选择了13份7oe亚基姊妹材料,并采用反相高效液相色谱(RP-hplc)和凝胶色谱(se-hplc)测定了glu-b1al(7oe + 8)。 hmw-gs的总量和面团的强度。任等人。 [5]使用两对sts引物来验证7oe引物的特异性,并提供了一种快速检测方法。

矮小麦是利用“矮化1号”授粉太谷核不育小麦,f1不育植株和高秆品种用于检验杂交,以及中国自主创新的重大科技成果。矮小麦的后代种群中有一半是杂合矮生雄性不育植株和半自养非矮化能植物,这是一种理想的轮回选择工具[3]。金强5号的质量达到国家一级强筋小麦标准,质量指标与加麦和硬红泉相似。张平平检测到7oe亚基[4]。

Ragupathy等[8]基于巢的ltr逆转和重复片段的结合区设计了两个sts标记,并检测了400多个小麦品种。通过对基因座的研究可以有效地鉴定7oe基因,这是对7oe基因的快速和准确的检测。该组中的分布提供了可能性。本研究对195株矮小麦和金强5号高代株系的7oe亚基进行了分子检测,确定了该位点等位基因的分布,并测试了材料的混合特性。育种提供有用的材料以及分子标记辅助的选择方法。1材料和方法

1.1试验材料

195个高代菌株以金强5号为轮回亲本,与矮小麦背靠背。 2009年,他们种植在天津市武清区周庄村,每排2排,长2米,行距30厘米,按需5厘米。 2010年进一步扩展了9个非7oe亚基和6个具有优良农艺性状的7oe亚基,以分析它们的混合特性。

1.2基因组提取

小麦基因组DNA通过sds方法提取[9]。从每种材料中提取两种dna种子,用紫外分光光度计测量dna浓度,并将最终浓度调节至20ng·μl-1。

1.3标记检测

小麦7OE亚基引入及揉捏特性的研究

使用由ragupathy等人开发的显性sts标记检测bx7oe基因。 [8]。引物由天津润泰科技发展有限公司合成。

标记(反转录转座子左侧的重复片段和引物)tabac1215c06-f5175 \' - acgtgtccaagctttggttc-3 \',

Tabac1215c06-r9645 \ ' - gattggtgggtggatacagg-3 \';

pcr反应体系为20μl,含10×pcr缓冲液2μl,dntp(a,t,c,g),每个200μmol·l-1,1μl(10mmol·l-1)/引物,taqdna聚合酶(takara) )1 u,模板dna50ng。标记物1的PCR反应在94℃变性5分钟;在94℃下变性30秒,在63℃下退火30秒,在72℃下延伸1分钟,35个循环,并在72℃下延伸5分钟。

分离pcr扩增产物并通过1.5%琼脂糖凝胶电泳检测。缓冲系统为1×tae溶液,180v电压电泳30min,用溴化乙锭染色,用geldocxrsystem扫描并储存在计算机中。

1.4研磨方法

根据aacc26-21a的方法,由德国brabendersenior试验机进行研磨。

1.5揉混合特征检测

美国国家公司生产的混合仪器采用10g揉钵钵aac



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